Thermostable trypsin-like protease by Penicillium roqueforti secreted in cocoa shell fermentation: Production optimization, characterization, and application in milk clotting.

The increased demand for cheese and the limited availability of calf rennet justifies the search for milk-clotting enzymes from alternative sources. Trypsin-like protease by Penicillium roqueforti was produced by solid-state fermentation using cocoa shell waste as substrate. The production of a crude enzyme extract that is rich in this enzyme was optimized using a Doehlert-type multivariate experimental design. The biochemical characterization showed that the enzyme has excellent activity and stability at alkaline pH (10-12) and an optimum temperature of 80°C, being stable at temperatures above 60°C. Enzymatic activity was maximized in the presence of Na+ (192%), Co2+ (187%), methanol (153%), ethanol (141%), and hexane (128%). Considering the biochemical characteristics obtained and the milk coagulation activity, trypsin-like protease can be applied in the food industry, such as in milk clotting and in the fabrication of cheeses.

Produção de enzimas por fungos filamentosos / Production of enzymes by filamental fungi

Estudos utilizando fungos endofíticos como produtores de metabólitos secundários de interesse biotecnológico vem sendo explorados. Assim, o presente trabalho objetivou avaliar a produção de enzimas por fungos filamentosos endofíticos, sendo escolhida a cepa 50 (C50), proveniente da coleção de cultura do Laboratório de Produtos Naturais e Biotecnologia (LPNBio) da UESB. A produção das enzimas amilase, celulase, invertase, lipase e poligalacturonase foi avaliada pelo o índice enzimático, atividade enzimática e verificado o tempo de fermentação de maior produtividade. Com exceção da invertase, a C50 apresentou atividade para as demais enzimas, destaque para lipase e poligalacturonase no tempo de 96 horas de fermentação. Estes resultados mostraram que a C50 tem potencial para ser explorada como produtora de enzimas.